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溴酚藍(lán),分子式:C19H10Br4O5S,淺黃色到棕黃色粉末;易溶于氫氧化鈉溶液,溶于甲醇、乙醇和苯,微溶于水(約0.4g/100ml),最大吸收波長(zhǎng)422nm。一種pH 指示劑,在pH 3.0~4.6范圍,顏色由黃變藍(lán)。常用做電泳指示染料,凝膠中電泳遷移速度在小分子核酸或蛋白質(zhì)區(qū)域。
中文名溴酚藍(lán) 英文名Bromophenol blue 別 稱四溴苯酚磺酞 化學(xué)式C19H10Br4O5S 分子量670.02 CAS登錄號(hào)115-39-9 EINECS登錄號(hào)204-086-2 危險(xiǎn)品運(yùn)輸編號(hào)UN 2265 3/PG 3
目錄
1 性狀描述
2 物理參數(shù)
3 分子結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)
4 計(jì)算化學(xué)數(shù)據(jù)
5 貯存方法
6 合成方法
7 用途說明
8 配置方法
性狀描述
淺黃色到棕黃色粉末;易溶于氫氧化鈉溶液,溶于甲醇、乙醇和苯,微溶于水(約0.4g/100ml);最大吸收波長(zhǎng)422nm
物理參數(shù)
熔點(diǎn):273℃(dec.)(lit.)
分子結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)
1、 摩爾折射率:123.26
2、 摩爾體積(cm3/mol):304.5
3、 等張比容(90.2K):893.7
4、 表面張力(dyne/cm):74.1
5、 極化率(10-24cm3):48.86
計(jì)算化學(xué)數(shù)據(jù)
1.疏水參數(shù)計(jì)算參考值(XlogP):無
2.氫鍵供體數(shù)量:2
3.氫鍵受體數(shù)量:5
4.可旋轉(zhuǎn)化學(xué)鍵數(shù)量:2
5.互變異構(gòu)體數(shù)量:3
6.拓?fù)浞肿訕O性表面積92.2
7.重原子數(shù)量:29
8.表面電荷:0
9.復(fù)雜度:662
10.同位素原子數(shù)量:0
11.確定原子立構(gòu)中心數(shù)量:0
12.不確定原子立構(gòu)中心數(shù)量:0
13.確定化學(xué)鍵立構(gòu)中心數(shù)量:0
14.不確定化學(xué)鍵立構(gòu)中心數(shù)量:0
15.共價(jià)鍵單元數(shù)量:1
貯存方法
1.儲(chǔ)存于陰涼、通風(fēng)的庫(kù)房。遠(yuǎn)離火種、熱源。
2.應(yīng)與氧化劑等分開存放,切忌混儲(chǔ)。
3.配備相應(yīng)品種和數(shù)量的消防器材。
4.儲(chǔ)區(qū)應(yīng)備有泄漏應(yīng)急處理設(shè)備和合適的收容材料 。
合成方法
1.將苯酚紅溶于冰乙酸,攪拌下加入溴溶于冰乙酸的溶液,攪拌幾分鐘后傾入60℃熱水中,冷卻至室溫,放置過夜。過濾,依次用冰乙酸、苯洗滌濾餅,晾干,得溴酚藍(lán)。
2.將酚紅溶于冰乙酸中,加熱至沸,滴加溴溶于冰乙酸中的溶液,黃色固體析出時(shí),過濾,用乙酸洗去游離溴,置于空氣中干燥后即得粗品。用冰乙酸或丙酮與冰乙酸混合溶劑重結(jié)晶,得純品溴酚藍(lán)。
3.將酚紅和溴分別溶于醋酸中,制成溶液。先將酚紅醋酸溶液加熱至沸,然后在攪拌下緩慢加入溴的醋酸溶液:當(dāng)酚紅反應(yīng)完全且黃色晶體不再析出后,冷卻,過濾。用少量醋酸洗去結(jié)晶中的游離溴后,用醋酸或丙酮 醋酸進(jìn)行重結(jié)晶,在空氣中干燥得純品溴酚藍(lán)。
用途說明
配置溴酚藍(lán)指示液。用途:變色范圍:pH2.8-4.6(黃-藍(lán)),酸堿指示劑;非水滴定用指示劑,蛋白電泳染色;病毒化驗(yàn)等 。
配置方法
方法1:1%的溴酚藍(lán)
將托盤天平上稱取1g溴酚藍(lán)定溶于100ml無水乙醇中,轉(zhuǎn)移入滴瓶中,貼標(biāo)簽備用。
方法2:0.05%的溴酚藍(lán)
配western blot用的2*SDS上樣緩沖液需要用到0.1%的溴酚藍(lán),2-DE中溴酚藍(lán)一般也是配成0.1%母液。實(shí)際上,溴酚藍(lán)在水中的溶解度不高,直接將0.1g溴酚藍(lán)溶于100ml水是有困難的。下面是其較合適的配制方法:
0.05%的溴酚藍(lán)配制方法:取溴酚藍(lán)0.1g,加0.05mol/L氫氧化鈉溶液3.0ml使溶解,再加水稀釋至200ml,即得。 變色范圍pH2.8~4.6(黃→藍(lán)綠)。只是不知道加入NaOH會(huì)不會(huì)影響2-DE實(shí)驗(yàn)。估計(jì)影響不大,因?yàn)橹甘緞┯昧慨吘购苌佟?/p>
方法3:1%溴酚藍(lán)
加1g水溶性鈉型溴酚藍(lán)于100ml水中,攪拌或渦旋混合直到完全溶解。溴酚藍(lán)其鈉鹽易溶解在水里。